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酶联接免疫吸附剂测定(Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay，ELISA)是一种结合抗原、抗体特异性反应和酶对底物高效催化作用的高敏感性免疫学实验技术。ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性，酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。在测定时，受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应，洗涤使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开，再加入酶标记的抗原或抗体，通过反应使其结合在固相载体上。此时固相上的酶含量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。

样本要求

1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟后、离心20分钟左右(2000-3000 转/分)、仔细收集上清、保存过程中如有沉淀形成、应再次离心。

2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂、混合10-20分钟后、离心20分钟左右(2000-3000 转/分)、仔细收集上清、保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。 

3. 尿液:用无菌管收集、离心20分钟左右(2000-3000 转/分)、仔细收集上清、保存过程中如有沉淀形成、应再次离心、胸腹水、脑脊液参照此实行。 

4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时、用无菌管收集、离心20分钟左右(2000-3000 转/分)、仔细收集上清。 

5. 培养细胞:检测细胞内的成份时、用PBS(PH=7.2～7.4)稀释细胞悬液、细胞浓度达到100 万/ml左右、通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂、以使细胞破坏并放出细胞内成份、离心20分钟左右(2000-3000 转/分)、仔细收集上清、保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。 

6. 组织标本:切割标本后、称取重量、加入一定量的PBS、PH=7.4。用液氮迅速冷冻保存备用、标本融化后仍然保持2-8℃的温度、加入一定量的PBS(PH=7.4)、或组织蛋白萃取试剂、用手工或匀浆器将标本匀浆化、离心20分钟左右(2000-3000转/分)、仔细收集上清、分装后一份待检测、其余冷冻备用。
实验流程

交付结果

原始OD值
数据分析结果