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202001-11
分子间互作的5大实验方法:①蛋白质-蛋白质 ②蛋白质-RNA ③蛋白质-DNA ④蛋白质-DNA/RNA ⑤RNA-DNA 一、蛋白质-蛋白质 1.免疫沉淀(IP) 2.免疫共沉淀(co-IP) 3.GST pull-down ……
IP 是利用抗体特异性反应富集纯化目的蛋白的一种方法,可用于目的蛋白的定性和定量分析。 1 IP 研究基础 2 IP原理 ①IP 结合原理 IP是利用抗原蛋白质和抗体的特异性结合以及细菌蛋白质的“protein A/G”特异性的结合到抗体(免疫球蛋白)的Fc片段的现象开发出来的方法。 ②IP 分离原理 3 IP 实验流程 4 IP 实验实施
Co-IP:研究的是体内自然状态下的蛋白质互相作用,不能显示蛋白质之间的相互作用是直接还是间接的。 IP:根据抗原和抗体的特异性结合,利用抗体将靶标蛋白分离或纯化,检测某一种蛋白的表达情况。 2、Co-IP简单介绍 3、Co-IP 原理 ProteinA/G ProteinA/G 能特异性地结合到免疫球蛋白的 FC 片段,因此能和抗体结合捕获复合物,而抗体与目标蛋白结合,目标蛋白和相互作用的蛋白结合。 X代表复合物。
酵母感受态细胞的制备及质粒的转化 (1) 抽提BD和AD的相关质粒(浓度最好在100-200ng/μL); (2) 预先灌制好需要的平板及各种培养基; (3)酵母感受态的制备: 1)将酵母菌株(AH109或者是其他的菌株)在YPDA培养基平板上划线,30℃倒置培养3天左右,直到克隆大小为2-3m……
ZSCI国家自然科学基金项目查询系统】 (V2.0正式版) 该系统从11月上线到现在,我们的程序猿小哥又对系统做了一些优化,国家自然科学基金项目查询V2.0正式版正式免费开放上线了。 2.0版本更新内容:(基础功能不变) ①增加学科热度比例; ②增加各类统计分析、整体性分析,分析更加完善; ③电脑端增加【国自然基金委项目综合查询系统】、【科学网基金项目查询系统】、【ZSCI文献数据库】、【国自然撰写工具包】4个友情链接。 ④优化系统页面细节; ⑤优化手机端的