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胶点鉴定

利用MALDI-TOF/TOF技术鉴定双向电泳中指定的胶点(考染、银染或DIGE)或单一纯化蛋白样品。

 

技术特点 

基础类产品:适用于低复杂样本,为2D gel研究提供结果。

检测速度迅速:UltrafleXtreme平台的TOF和TOF/TOF模式,其采样速度可达1 kHz。

动态范围:对低丰度蛋白具有较好的检测结果,可达到ng级别的鉴定能力。 

信息分析内容

数据产出统计

蛋白质鉴定结果

技术流程

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样本要求

蛋白含量≥50pmol,胶点直径≥1.0mm。考染或银染染色肉眼可见,银染胶不能使用戊二醛进行显色,且保证在电泳后一周内进行切胶送样。

含盐量:挥发性无机盐

 

质谱平台

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UltrafleXtrem, Bruker

绘制水稻胚胎的蛋白质谱

Proteomics study of rice embryogenesis: Discovery of the embryogenesis-dependent globulins

Electrophoresis. 2012 Apr;33(7):1129-38. doi: 10.1002/elps.201100398. 

研究内容:

植物胚胎是种子的生发中心,通过2D gel +MALDI-TOF-TOF技术鉴定水稻胚胎形成时期蛋白表达变化趋势,有助于阐明胚胎发生的分子机制。

研究路线

样本:提取水稻授粉后不同时期(6d,12d,18d)的胚胎蛋白

技术:2D gel + MALDI-TOF/TOF

 

研究结果:

共有66个胶点在胚胎形成时期被调控,其中通过MALDI技术鉴定到53个点。

鉴定到的蛋白被注释到多个功能条目中,如储存、胚胎发育、胁迫应答、糖酵解以及蛋白代谢。

大部分差异蛋白都来源于3种球蛋白,通过WB、蛋白水解、非变性胶电泳等验证方法显示球蛋白多态性是由蛋白水解造成,初步推测这些球蛋白在胚胎发育过程中发挥分子伴侣的作用。