Label-free:无标签标记的定量蛋白质组学研究,依赖于繁杂的信息分析完成定量过程,主要有两种:信号强度和谱图计数法[1]。前者根据一级质谱相关的肽段峰强度(Mass spectral peak intensity)、峰面积(Peak area)、液相色谱保留时间(LC retention time)等信息进行定量分析;后者根据二级质谱相关的每个蛋白鉴定到的肽段总次数(Peptide hide或Spectral counts)、所鉴定肽段的离子价位(Ion counts of identified peptides)等信息进行定量分析。定量原理见下图:
技术特点
无标记:克服标记样本的局限性,可研究大规模样本
数据要求高:基于高实验重复性,得到准确结果
定量方法:基于信息分析进行差异蛋白定量
数据量大:信息分析要求高
信息分析内容
数据产出统计
蛋白质鉴定结果
蛋白质定量结果
蛋白质GO分析
蛋白质COG分析
蛋白质Pathway代谢通路分析
差异蛋白GO富集分析
差异蛋白的Pathway富集分析
重复性分析(仅针对有重复设计的项目)
多样品间表达模式聚类(适用于样本数≥3的项目)
定制化信息分析
蛋白质组与转录组关联分析
参考文献
[1] Zhu W, J.W. Smith, and C.M. Huang. Mass spectrometry-based label-free quantitative proteomics.J BIOMED BIOTECHNOL. 2010; 2010: p. 840518.