科技服务

定量PCR(Quantitative PCR, qPCR)，也称实时PCR(Real-time PCR)或者实时定量PCR，是指借助荧光染料或荧光标记的特异性探针，在PCR指数扩增期间实时监测PCR反应体系中的荧光信号强度的变化，从而对目的基因进行定量分析的PCR检测技术。

术语

基线: 实时荧光定量PCR反应的基线是指在PCR开始的几个循环中(-般为3-15个循环) 的信号水平。此阶段的荧光信号变化量极小。低水平的基线信号相当于反应的背景或噪声。每个实时荧光定量PCR反应的基线应通过用户分析或扩增曲线自动分析，根据经验确定。基线的设置，会影响到荧光阈值及Ct值。

荧光阈值: 荧光阈值是在荧光扩增曲线上人为设定的一个值，它可以设定在荧光信号指数扩增阶段任意位置上，一般荧光阈值默认是PCR 3-15个循环荧光信号标准偏差的10倍。

Ct值: Ct值指的是PCR扩增过程中扩增产物的荧光信号达到设定的阈值时所经过的循环数。

标准曲线: 标准曲线是标准物质的物理/化学属性跟仪器响应之间的函数关系。对已知拷贝数的标准样品做系列稀释，对不同稀释度的标准样品进行荧光定量PCR并记录Ct值，根据Ct值及拷贝数的对数绘制得到标准曲线，标准曲线的纵坐标代表起始拷贝数的对数，横坐标代Ct值。

服务要求

1.样本要求

细胞：细胞数＞10⁶；

组织：总量＞100 mg；

DNA或RNA样品：总量＞2 μg。

2.相关信息
靶基因信息：基因序列或GeneBank Accession Number 等。
背景资料：生物物种信息（Human、Mouse、Rat 等）、DNA/RNA 来源、基因丰度等。
qPCR引物由客户提供或我司设计合成。

结果交付

1.RNA或DNA的浓度数据和qPCR的原始数据(熔解曲线和扩增曲线)。

2.检测报告(包括实验试剂、材料仪器、软件设置参数、实验方法、结果及分析等)。